Quy trình (SOP) kiểm tra hiệu quả của đèn UV lắp đặt trong LAF và Pass box.
Quy trình vận hành tiêu chuẩn để theo dõi hiệu suất của tia UV được cài đặt trong LAF và Pass box
 |
| ĐĨA PETRY |
1.0 MỤC TIÊU
Để đặt ra một Quy trình là cung cấp các hướng dẫn để theo dõi LAF & Pass Box UV Light Hiệu quả.
2.0 PHẠM VI
Quy trình này được áp dụng cho tất cả các đơn vị UV Light được cài đặt trong phần vi sinh.
3.0 TRÁCH NHIỆM
Chuyên viên Vi sinh
4.0 TÀI KHOẢN
Trưởng phòng – QA & QC
5.0 QUY TRÌNH
 |
| PASS BOX CÓ ĐÈN UV |
5.1 Chuẩn bị môi trường SCDA (Soyabean Casein Digest Agar) theo SOP để chuẩn bị môi trường nuôi cấy.
5.2 Rót khoảng 15 Pha 20 ml dung dịch thạch SCDA vô trùng đã được làm mát (40-45ºC) vào các đĩa Petri 90 mm trong LAF vô trùng.
5.3 Cho phép hóa thạch dịch trong đĩa Petry ở môi trường LAF, sau khi dán nhãn tất cả các đĩa có tên phân biệt, số lô chuẩn bị và ngày chuẩn bị.
5.4 Đảo ngược và ủ các đĩa Petry (thạch) ở 30 đến 35 0C trong 24 giờ trong tủ ấm BOD (Biological oxygen demand). Sau khi ủ, kiểm tra thực tế các đĩa xem có bất kỳ sự nhiễm bẩn nào không (bằng chứng có sự phát triển vĩ mô của nấm), nếu có ô nhiễm, hãy loại bỏ các đĩa theo tiêu chuẩn để tiêu hủy chất thải vi khuẩn bằng cách hấp tiệt trùng.
5.5 Sau khi ủ trước, chuyển 1-1 ml không ít hơn 105 cfu mỗi ml nuôi cấy Bacillus subtilis (vi khuẩn có hình que ) sang hai đĩa SCDA Petri và rải khuẩn lạc bằng máy rải vô trùng. (Chuẩn bị 106 cfu cho mỗi ml huyền phù Bacillus subtilis theo thử nghiệm hiệu quả của thuốc khử trùng.
5.6 Bây giờ bọc một đĩa Petri chứa Bacillus subtilis trong giấy nhôm và không bọc các đĩa Petri khác. Bây giờ chuyển cả hai đĩa Petri trong LAF. Mở nắp của đĩa Petri chưa mở.
 |
| LAF VI SINH |
5.7 Bây giờ bật đèn UV trong 30 phút.
5,8 Sau 30 phút tiếp xúc, tắt đèn UV và đóng nắp đĩa Petri chưa được bọc.
5.9 Ủ cả hai đĩa Petri trong tủ ấm ở 30 – 35 độ C trong 24-48 giờ.
5.10 Chuẩn bị kiểm soát tích cực bằng cách nhuộm nuôi cấy khuẩn Bacillus subtilis và kiểm soát tiêu cực như trong đĩa không có dấu vết.
5.11 Áp dụng quy trình tương tự đối với Đèn UV của LAF & Pass box khác. Để kiểm tra Hiệu quả của tia UV của LAF của Phòng Vô trùng, không thực hiện thử nghiệm trong Phòng Vô trùng. Đối với thử nghiệm, đèn UV của LAF vô trùng phải được thực hiện bởi kỹ thuật viên phòng kiểm thí.
5.12 Sau khi ủ quan sát các đĩa cho tổng số vi khuẩn. Ghi lại kết quả vào hồ sơ kiểm tra hiệu quả UV Light.
5.13 Phòng ngừa
5.13.1 Bật đèn UV sau khi phơi các đĩa trên bàn làm việc của LAF.
5.13.2 Tắt đèn UV trước khi thu các tấm.
5.14 tần suất
5.14.1 Một lần trong tháng
5.15 Giới hạn / Tiêu chí chấp nhận
5.15.1 Không nên có sự tăng trưởng trong đĩa Petri chưa được bao bọc & nên có sự tăng trưởng trong tấm Petri được bọc trong giấy nhôm. Kiểm soát tích cực sẽ cho thấy sự tăng trưởng và kiểm soát tiêu cực không nên cho thấy bất kỳ sự tăng trưởng nào.
6.0 TỪ VIẾT TẮT
SOP: Quy trình vận hành tiêu chuẩn
QA: Đảm bảo chất lượng
QC: Kiểm soát chất lượng
NA: Không áp dụng
IPA: Rượu Isopropyl
LAF: Lưu lượng không khí
cfu: Đơn vị hình thành vi khuẩn trong đĩa
SCDA: Các loại khuẩn lạt để nuôi cấy vi sinh
Tìm hiểu thêm về tia UV
Bức xạ UV là gì?
Chiếu xạ tia cực tím là một công nghệ đã được chứng nhận để khử nhiễm bề mặt, cũng như không khí và nước trong nhiều thập kỷ. Ánh sáng tia cực tím bao phủ phổ bước sóng từ 100 đến 380 nm và được chia thành ba vùng theo bước sóng: UV-A (320 đến 400 nm), UV-B (280 đến 320 nm) và UV-C (200 đến 280 nm) . Trong số các phạm vi bước sóng này, UV-C đã được chứng minh là có hiệu quả cao nhất trong việc vô hiệu hóa vi sinh vật. Điều này là do bước sóng 250–270nm, bị hấp thụ mạnh và chủ yếu bởi axit nucleic của tế bào vi sinh vật dẫn đến bất hoạt vi sinh vật.
Điều này là do các thành phần nội bào của vi khuẩn (ví dụ: RNA, DNA và protein) có thể hấp thụ các photon UV-C một cách nhạy cảm. Các photon UV-C bị hấp thụ gây ra thiệt hại nghiêm trọng cho hệ thống gen của vi sinh vật (axit nucleic và protein vi sinh vật), ngăn chúng sao chép và tồn tại, trong đó liên kết adenine-thymine bị phá vỡ và liên kết cộng hóa trị, pyrimidine dimer, được tạo ra giữa hai adenine dẫn đến tế bào không có khả năng sao chép.
Vì vậy, tác dụng của tia UV lên vi sinh vật được gọi là “bất hoạt” chứ không phải “diệt khuẩn”.
Các nguồn sáng UV-C được sử dụng phổ biến nhất là gì?
Nhiều thử nghiệm và nghiên cứu đã cho thấy tầm quan trọng của đèn diệt khuẩn UV-C trong việc giảm số lượng vi sinh vật gây bệnh còn sống bao gồm Staphylococcus vàng kháng methicillin, Enterococci kháng Vancomycin, Clostridium difficile, vi rút cúm, vi rút Corona và nhiều loại khác.
Các nguồn sáng UV-C khác nhau đã được sử dụng cho các môi trường công nghiệp và chăm sóc sức khỏe khác nhau, chẳng hạn như đèn UV thủy ngân áp suất thấp và trung bình thông thường (254 nm), điốt phát sáng UV (UV-LED) 200-280 nm, đèn xenon xung (200-390 nm) và tia UVC xa (200–240 nm) và đèn micro plasma.
Hầu hết tất cả các công nghệ đều sử dụng phổ UV-C ngoại trừ PX-UV sử dụng các xung cường độ cao của toàn bộ phổ UV, trong đó đèn thủy ngân áp suất thấp được sử dụng nhiều nhất trong các ứng dụng diệt khuẩn. Tuy nhiên, những nguồn sáng này có khác nhau về hiệu quả đạt được không? Hay tất cả đều phụ thuộc vào cường độ ánh sáng hoặc liều lượng tia cực tím được cung cấp bất kể nguồn sáng?
Ánh sáng UV-C được kiểm tra như thế nào?
Để trả lời những câu hỏi này, chúng tôi đã phát triển một phương pháp thử nghiệm và chúng tôi đang trong quá trình kiểm tra hiệu quả của các nguồn sáng khác nhau và liệu liều lượng có tương quan thuận với hiệu quả bất kể loại nguồn sáng hay không.
Một số đánh giá tài liệu mà chúng tôi thực hiện đã củng cố sự hiểu biết của chúng tôi rằng một số nhóm nghiên cứu đang mô tả các liều lượng khác nhau để đạt được hiệu quả tương tự (thể hiện ở khía cạnh giảm log).
(UV-LED) phát ra ở bước sóng 260 nm được đánh giá để xác định động học bất hoạt của vi khuẩn, vi rút và bào tử so với chiếu xạ UV ở áp suất thấp. Các sinh vật thử nghiệm là Escherichia coli, một loại virus không có vỏ bọc (MS-2) và một bào tử vi khuẩn (Bacillus atrophaeus). Đối với tia cực tím áp suất thấp, liều giảm 4 log là: E. coli B, 6,5 mJ/cm2; MS-2, 59,3 mJ/cm2; và B. atrophaeus, 30,0 mJ/ cm2 . Đối với đèn LED UV, liều giảm 4 log là E. coli, 6,2 mJ/cm² MS-2, 58 mJ/cm²; và B. atrophaeus, 18,7 mJ/cm2. Động học bất hoạt vi khuẩn của hai công nghệ UV không khác biệt đáng kể đối với E. coli và MS-2 nhưng khác nhau đối với bào tử B. atrophaeus. Kết luận rằng đèn LED UV ở bước sóng 260 nm ít nhất cũng có hiệu quả trong việc vô hiệu hóa vi khuẩn trong nước như các nguồn UV LP thông thường nhưng không hiệu quả trong việc vô hiệu hóa bào tử vi khuẩn.
Đối với ánh sáng UV-C xa, Welch et al. (2018) đã quan sát thấy rằng tốc độ bất hoạt của vi-rút cúm bằng đèn kích thích KrCl (UV-C xa), (D90 = 1,28 mJ/cm2; D95 = 1,6 mJ/cm2) tương đương với các giá trị (D90 = 1,04 mJ/cm2; D95 = 1,1 mJ/cm2) được báo cáo bởi McDevitt và cộng sự. (2003), người đã sử dụng tia UV áp suất thấp thông thường (254 nm).
Tuy nhiên, các tác giả kết luận rằng ánh sáng tia cực tím thông thường (dựa trên thủy ngân) vẫn có hiệu quả diệt khuẩn cao hơn xét về mức tiêu thụ năng lượng điện so với đèn Excimer. Do đó, việc sử dụng đèn Excimer như một công nghệ diệt khuẩn quy mô lớn vẫn là chủ đề của những cải tiến trong tương lai về hiệu quả sử dụng năng lượng.
Trong khi đó, một số bài báo nghiên cứu được xuất bản gần đây đã đề xuất liều tia cực tím để vô hiệu hóa SARS-CoV-2 do UVC gây ra. Patterson và đồng nghiệp đã báo cáo rằng liều 20 mJ/cm2 và 40 mJ/cm2 của UVC 254 nm có thể đủ để đạt được mức bất hoạt tương ứng là 4 log và 6 log đối với SARS-CoV-2. Inagaki và nhóm của cô đã báo cáo hiệu suất của đèn LED UV 280 nm là 3,1 log ở mức 37,5 mJ/cm2. Một lần nữa, điều này cho thấy sự khác biệt về hiệu quả khi tiếp xúc các bề mặt với liều lượng tương tự.
Các nguồn sáng UV-C trên thị trường
Có rất nhiều nguồn sáng trên thị trường, được sử dụng theo nhiều cách, được hỗ trợ bởi nhiều tuyên bố tiếp thị và nhiều nghiên cứu khoa học. Tuy nhiên, những phát hiện của họ không nhất quán và giá trị z (liều cần thiết để giảm log) khác nhau giữa các nghiên cứu.
Điều này có thể là do sự khác biệt về các thông số và điều kiện thí nghiệm trong nghiên cứu của họ. Người ta biết rằng hiệu quả của tia UV trên các bề mặt có liên quan nhiều đến khoảng cách, sự hiện diện của bóng tối, thời gian tiếp xúc và các điều kiện khác cũng như độ ẩm, thách thức (loại vi sinh vật bị bất hoạt) và chính bề mặt đó. Để hiểu rõ hơn, chúng tôi đã phát triển một phương pháp thử nghiệm để đo lường hiệu quả của các nguồn sáng khác nhau đối với một số sinh vật được quan tâm có liên quan.
Nghiên cứu sẽ đo lường hiệu quả với thời gian và khoảng cách phơi sáng khác nhau với từng nguồn sáng. Như đã đề cập, thuật ngữ liều lượng (lượng năng lượng tia cực tím mà bề mặt tiếp xúc) thường được sử dụng trong tài liệu. Do đó, phương pháp này nhằm mục đích tìm hiểu xem liệu “liều” của một loại nguồn sáng UV (theo thông số đã đặt) có thể được chuyển sang loại nguồn sáng UV khác hay không.
Phương pháp kiểm tra hiệu quả mà chúng tôi phát triển cũng sẽ nhằm mục đích xếp hạng các nguồn sáng UV về mặt hiệu quả, thời gian thực hiện và chi phí phần cứng khi sử dụng trong một môi trường cụ thể nhằm tạo ra phương pháp so sánh rõ ràng khi kết hợp nguồn sáng thích hợp vào các sản phẩm mới. Nghiên cứu sẽ xem xét hiệu suất của đèn huỳnh quang thủy ngân, đèn LED UV-C, bóng đèn kích thích và nguồn xenon dạng xung, là những loại nguồn sáng chính được tìm thấy và báo cáo trong tài liệu.
Theo suy nghĩ cuối cùng, liều UV-C diệt khuẩn hiệu quả phụ thuộc vào một số yếu tố và nghiên cứu hoặc phương pháp thử nghiệm này sẽ cho phép chúng tôi xác định liều lượng chính xác cần thiết cho từng nguồn ánh sáng UV để gây bất hoạt vi khuẩn hiệu quả khi có các điều kiện thí nghiệm khác nhau. . Chúng tôi sẽ chia sẻ kết quả cùng với phương pháp, nguồn sáng và vi sinh vật được sử dụng ngay khi có sẵn.
0914 24 20 94 | nguyenhoangquocan@gmail.com.
Tặng mình ly cà phê ☕
